大肠菌群显色培养基用途:用于快速、准确检测大肠菌群,培养24小时,大肠菌群显蓝绿色 肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。
成份 (g/L)
特殊营养物质
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47.55
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显色剂
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0.35
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琼脂
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13.0
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pH 7.0-7.2 25 ℃
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶, 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ,混匀,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ~ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠菌群 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h 小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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单增李氏菌
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27853
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-/+
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无色
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-/+
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无色
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大肠杆菌
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25922
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+++
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蓝色
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沙门氏菌
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+++
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无色
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大肠菌群
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+++
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蓝色
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方法的局限性
本培养基鉴定 大肠菌群 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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寄标本时需注明以下情况
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
4、联系方式
5、实验后标本是否寄回
客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。