O157显色培养基用途:用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色
O157显色培养基是用于食品、病人粪便样品中O157:H7菌的快速检测。O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
特殊营养物质
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68.4
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混合显色剂
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2.6
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琼脂
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15.0
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pH 7.0 ± 0.1 25 ℃
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CT 添加剂 1ml/ 支 *5
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 17.2g加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热2分钟左右。冷却至 45-50 ℃时,加入 CT 添加剂混匀,
倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 36±1℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中, 36±1℃ 增菌培养 18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到 O157 菌显色培养基上,做 2 个平板;
4 、 36±1 ℃培养 18-24h , O157:H7 菌显亮红色,淡红色或红色 ,菌落周围没有蓝色晕圈 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色, 其它细菌显蓝色、黄色或无色;
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
注:必须在 36±1℃ 培养 24 小时内判读结果,以免菌落颜色发生变化。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡蓝色。制备好的平板呈蓝色色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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大肠杆菌 O157
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35150
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+++
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亮红色
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-/+
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黄色 或无色
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大肠杆菌
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25922
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+++
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暗蓝色,菌落周围有晕圈
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沙门氏菌
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14028
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+++
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蓝色
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奇异变形杆菌
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12453
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+/-
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无色
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方法的局限性
本培养基对典型大肠杆 O157:H7 必须做血清学试验或生化试验。
典型特征
典型大肠杆菌O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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寄标本时需注明以下情况
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
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5、实验后标本是否寄回
客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。