弧菌显色培养基用途:用于弧菌的显色培养,副溶血性弧菌显蓝色,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色或无色。
副溶血性弧菌显色培养基用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色至蓝色,其它弧菌显无色;其它细菌显黄色或无色,且细菌菌落很小。本培养基的特异性高,可以克服 TCBS 培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
特殊营养物质
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75.0
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混合显色剂
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2.3
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琼脂
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15.0
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pH 8.6 ± 0.1 25 ℃
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 18.46g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 10-20 分钟。冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 1ml 样品液加入 9mlSCPB 肉汤或碱性蛋白胨水中, 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到副溶血性弧菌显色培养基上,做 2 个平板;
4 、 37 ℃培养 18-24h , 溶血性弧菌显蓝色至蓝绿色 , 霍乱弧菌和其它弧菌显无色 ,其它细菌显黄色或无色且菌落很小;
5 、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡黄色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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副溶血性弧菌
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+++
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蓝色至蓝绿色
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-
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-
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大肠杆菌
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25922
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-/+
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无色
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溶藻弧菌
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+++
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无色
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霍乱弧菌
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+++
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无色
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方法的局限性
本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌,副溶血性弧菌的特异性可达 90% ,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
典型副溶血性弧菌显蓝色至蓝绿色 , 霍乱弧菌和其它弧菌显无色。
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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2、所测项目
3、是否做复孔
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客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。