念珠菌显色培养基用途:用于念珠菌分离和鉴定,白色念珠菌显绿色
念珠菌显色培养基根据酶底物法,通过显色来区别不同念珠菌,25-28℃培养48小时后,白色念球菌显蓝绿色,热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌显紫色,克柔假丝酵母显粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
成份 (g/L)
营养物质(蛋白胨等)
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30.0
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色素
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2.9
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氯霉素
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0.1
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琼脂
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15.0
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pH 6.0 ± 0.2 25 ℃
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品9.6g(可按4.8g/100ml的比例扩大或缩小),加入200ml蒸馏水或纯化水中,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。将加热后的培养基水浴冷却至45-50℃,轻轻地摇匀,倾入无菌平皿(9cm的15ml/皿,7cm的10ml/皿),琼脂完全凝固后,在36℃±1℃的培养箱中倒置放置0.5-1小时,备用。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干粉培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液涂布或划线接种于平板上;
3、25-28℃培养48h。白色念珠菌典型特征为蓝绿色,热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌显紫色,克柔假丝酵母显粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
4 、对可疑白色念珠菌菌落可划线接种到PDA琼脂平板上,25-28℃培养24-48小时,挑取单菌落做镜检和生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在25-30℃培养48小时:
质控菌株
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生长情况
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菌落颜色
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白色念珠菌
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+++
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蓝绿色
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热带念珠菌
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+++
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蓝灰色、铁蓝色
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克柔氏假丝酵母菌
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+++
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粉红色
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光滑念珠菌
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+++
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紫色
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其它念珠菌
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+++
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白色
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大肠杆菌
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-
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-
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方法的局限性
本培养基鉴定白色念珠菌,少数情况下可能会出现假阳性或假阴性,需做其它补充试验。
典型特征
白色念珠菌典型特征为蓝绿色,热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌显紫色,克柔假丝酵母显粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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寄标本时需注明以下情况
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
4、联系方式
5、实验后标本是否寄回
客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。