李斯特氏菌显色培养基用途:用于李斯特氏菌的显色培养,单增李斯特氏菌显蓝色,外围有一不透明环
李斯特氏菌显色培养基可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在 3 天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色,菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长,抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。
成份 (g/L)
基础培养基:
营养物质
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70.0
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显色剂
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1.0
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pH 7.2 ± 0.2 25 ℃
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李斯特氏菌添加剂 6.0g
李斯特氏菌抑菌剂 1 1ml*5 支
李斯特氏菌抑菌剂 2 1ml*5 支
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于 121 ℃高压灭菌 15 min 。冷至 50 ℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂 1 和 2 各 1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 5mm ,这样有利观察不透明环。
贮存
制备好的固体平板保存于 2-8 ℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
1 、按 SN 标准、 GB 标准、 FDA 标准、 ISO 标准或其它标准制备样品液;
2 、把 25g 样品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培养 48 小时;或把样品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混匀, 30 ℃培养 24 小时。
3 、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上, 37 ℃培养 24-48 小时。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
2 、微生物试验
在 37 ℃培养 24-48 小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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不透明环
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单增李斯特氏菌
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27853
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+++
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蓝色
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+
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绵羊李斯特氏菌
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+++
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蓝色
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+
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西尔李斯特氏菌
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+++
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蓝色
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-
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金黄色葡萄球菌
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25923
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++
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黄色
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-
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大肠杆菌
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25922
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-
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-
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-
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沙门氏菌
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-
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-
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-
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典型特征
单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时, 平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时, 平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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1、检测所用试剂全部为进口或本公司自产,适合检测包括血清、血浆、细胞培养上清、尿液、胸腹水、组织匀浆等标本。
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寄标本时需注明以下情况
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
4、联系方式
5、实验后标本是否寄回
客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。