金黄色葡萄球菌显色培养基用途：用于金黄色葡萄球菌的显色培养，金黄色葡萄球菌显蓝绿色
金黄色葡萄球菌显色培养基 (RFP) 用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中金黄色葡萄球菌的快速检测。符合 SN 标准、 GB 标准和 ISO 标准，金黄色葡萄球菌显灰黑色，其外围有一不透明沉淀环。由于本培养基中已含有免血浆，在 24-48 小时可以确定结果，无需进行确证试验，可以用于金黄色葡萄球菌的计数或分离培养，是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
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改良 BP 基础
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48.0
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琼脂
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10.0
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pH 7.0 ± 0.2 25 ℃
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RFP 添加剂： 30 瓶 *5ml
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 2.0g 加入 28ml 蒸馏水， 121 ℃ 高压灭菌 15 分钟。放置 50 -55 ℃ 水浴锅中 冷至50 -55 ℃ 左右时，加入1 瓶已溶解好的 RFP 添加剂 ( 可在 60 -80 ℃ 温度下10-20 秒快速溶解 ) ，混匀，样品可采用倾注法或表面划线法或涂布法进行金黄色葡萄球菌的检测。
RFP 添加剂的溶解：打开瓶盖，加入 5ml 无菌蒸馏水在无菌条件下溶解，注意动作不要太剧烈。在 37 ℃ 10 分钟内可以完全溶解 ( 或在 60 -80 ℃ 温度下10-20 秒快速溶解 ) 。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 ISO 标准或其它方法制备样品液；
2、取 1ml 适宜稀释度的样品液加入无菌平皿中心，每个稀释度取 2 个平皿 ；
3 、倾入 10-15ml 冷至 48 ℃ 左右的 BP 基础培养基到平皿中，混匀 ；
4 、培养基凝固后，放置培养箱 37 ± 1 ℃ 培养 18-24h ，典型的金黄色葡萄球菌为灰黑色菌落，其外围有一不透明圈，如果没有典型菌落出现，再培养 18-24 小时；
5 、计数所有外围有一不透明圈的菌落，无需进行确证试验。
注意：也可以用涂布法或划线法。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈淡黄色。制备好的平板呈白色半透明固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 24 ～ 28h 小时：
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质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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不透明环
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单增李氏菌
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27853
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+
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无色
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-
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金黄色葡萄球菌
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25923
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+++
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灰黑色
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+
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表皮葡萄球菌
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+++
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灰黑色
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-
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沙门氏菌
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-/+
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无色
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-
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大肠杆菌
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-/+
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无色
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-
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方法的局限性
本培养基用于直接鉴定金黄色葡萄球菌，如果在 18-24 小时没有出现典型菌落，需再培养 18-24 小时。有时金黄色葡萄球菌不显灰 黑色 ，但其 外围有一不透明圈。
典型特征
典型的金黄色葡萄球菌为灰黑色菌落，其外围有一不透明圈。
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为什么实验结束后，阴阳性对照正常，质控正常，但临床标本感觉显色较弱？
有如下几个可能的原因：
待测标本中可能不含强阳性标本，故结果可能是正常的：如有怀疑，可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂：酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂，可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常，但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出？
有如下几个可能的原因：
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本，但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出：确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久，或被反复冻融致待测物滴度下降，而未能检出：质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的，可存于 2-8℃，如需长期保存，应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装，并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确，滤光片不匹配：重新设定酶标仪的参数，特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后，目测结果正常，但酶标仪读值结果偏低？
可能是酶标仪参数设定不正确：重新设定酶标仪的参数，特别是检查滤光片是否匹配。
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客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
